目 次前 言.....................................................................................................................................................................ii1 適用范圍...........................................................................................................................................................12 規(guī)范性引用文件...............................................................................................................................................13 方法原理...........................................................................................................................................................14 試劑和材料.......................................................................................................................................................15 儀器和設備.......................................................................................................................................................26 樣品................................................................................................................................................................... 37 分析步驟...........................................................................................................................................................38 結果計算與表示...............................................................................................................................................49 準確度............................................................................................................................................................... 510 質(zhì)量保證和質(zhì)量控制.....................................................................................................................................611 廢物處置......................................................................................................................................................... 612 注意事項.........................................................................................................................................................6附錄 A（規(guī)范性附錄） 方法檢出限和測定下限............................................................................................ 7HJ 1268—2022ii前 言為貫徹《中華人民共和國環(huán)境保護法》《中華人民共和國水污染防治法》和《中華人民共和國海洋環(huán)境保護法》，防治生態(tài)環(huán)境污染，改善生態(tài)環(huán)境質(zhì)量，規(guī)范水中甲基汞和乙基汞的測定方法，制定本標準。本標準規(guī)定了測定地表水、地下水、生活污水、工業(yè)廢水和海水中甲基汞和乙基汞的液相色譜-原子熒光法。本標準的附錄 A 為規(guī)范性附錄。本標準為首次發(fā)布。本標準由生態(tài)環(huán)境部生態(tài)環(huán)境監(jiān)測司、法規(guī)與標準司組織制訂。本標準主要起草單位：山東省青島生態(tài)環(huán)境監(jiān)測中心。本標準驗證單位：山東省生態(tài)環(huán)境監(jiān)測中心、青島市城市排水監(jiān)測站、青島華測檢測技術有限公司、中國國檢測試控股集團青島京誠有限公司、析致通標技術檢測（北京）有限公司和浙江聚光檢測技術服務有限公司。本標準生態(tài)環(huán)境部 2022 年 12 月 12 日批準。本標準自 2023 年 6 月 15 日起實施。本標準由生態(tài)環(huán)境部解釋。HJ 1268—20221水質(zhì) 甲基汞和乙基汞的測定液相色譜-原子熒光法警告：實驗中使用的標準溶液和有機溶劑具有一定的毒性和揮發(fā)性，樣品前處理應在通風櫥內(nèi)操作，操作時應按要求佩戴防護器具，避免接觸皮膚和衣物。1 適用范圍本標準規(guī)定了測定水中甲基汞和乙基汞的液相色譜-原子熒光法。本標準適用于地表水、地下水、生活污水、工業(yè)廢水和海水中甲基汞和乙基汞的測定。取樣體積為 1 L，反萃取液體積為 3.0 ml，進樣體積為 100 μl 時，方法檢出限為0.08 ng/L～0.1ng/L，測定下限為 0.32 ng/L～0.4 ng/L。詳見附錄 A。2 規(guī)范性引用文件本標準引用了下列文件或其中的條款。凡是注明日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本標準。凡是未注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本標準。GB 17378.3 海洋監(jiān)測規(guī)范 第 3 部分：樣品采集、貯存與運輸HJ 91.1 污水監(jiān)測技術規(guī)范HJ 91.2 地表水環(huán)境質(zhì)量監(jiān)測技術規(guī)范HJ 164 地下水環(huán)境監(jiān)測技術規(guī)范HJ 442.3 近岸海域環(huán)境監(jiān)測技術規(guī)范 第三部分 近岸海域水質(zhì)監(jiān)測3 方法原理樣品中的甲基汞和乙基汞經(jīng)二氯甲烷萃取后，用 L-半胱氨酸-乙酸銨反萃取，反萃取液中的甲基汞和乙基汞與 L-半胱氨酸的絡合物經(jīng)液相色譜分離后，在紫外線的照射下，兩種絡合物被氧化劑氧化，將有機態(tài)的汞轉化為二價汞離子，二價汞離子被還原劑還原為汞原子，在汞空心陰極燈照射下，汞原子發(fā)射出特征波長的熒光，其熒光強度與汞的含量成正比。根據(jù)保留時間定性，外標法定量。4 試劑和材料除非另有說明，分析時均使用符合國家標準的分析純試劑，實驗用水為不含目標化合物的純水。4.1 鹽酸（HCl）：ρ＝1.18 g/ml，優(yōu)級純。4.2 乙酸（CH3COOH）：ρ＝1.05 g/ml。4.3 氯化鈉（NaCl）：優(yōu)級純。4.4 氫氧化鉀（KOH）：優(yōu)級純。4.5 L-半胱氨酸（C3H7NO2S）：純度≥99%。4.6 乙酸銨（CH3COONH4）：優(yōu)級純。4.7 硼氫化鉀（KBH4）。HJ 1268—202224.8 過硫酸鉀（K2S2O8）。4.9 硫酸銅（CuSO4·5H2O）。4.10 無水硫酸鈉（Na2SO4）。使用前在 400 ℃下灼燒 4 h，冷卻后，于磨口玻璃瓶中密封保存。4.11 甲醇（CH3OH）：高效液相色譜純。4.12 二氯甲烷（CH2Cl2）：農(nóng)殘級。4.13 載流：鹽酸溶液。用鹽酸（4.1）和水按 1:19 體積比混合。4.14 還原劑。稱取 5.0 g 氫氧化鉀（4.4），用水溶解后，加入 2.0 g 硼氫化鉀（4.7），混勻，用水定容至1L。臨用現(xiàn)配。4.15 氧化劑。稱取 5.0 g 氫氧化鉀（4.4），用水溶解后，加入 2.0 g 過硫酸鉀（4.8），混勻，用水定容至1L。臨用現(xiàn)配。4.16 反萃取液。稱取 1.0 g L-半胱氨酸（4.5）和 0.8 g 乙酸銨（4.6），用水溶解后定容至100 ml。臨用現(xiàn)配。4.17 流動相。稱取 1.2 g L-半胱氨酸（4.5）和 0.62 g 乙酸銨（4.6），用水溶解后轉移至1000 ml 容量瓶中，再加入 80 ml 甲醇（4.11），最后用水定容至標線，經(jīng)濾膜（4.23）過濾后使用。臨用現(xiàn)配。4.18 飽和硫酸銅溶液。稱取 50 g 硫酸銅（4.9），溶于 100 ml 水中，在聚乙烯瓶中保存，使用時取上層溶液。4.19 甲基汞標準貯備液：?(CH3Hg+)＝1.00 mg/L。購買以甲醇為溶劑的市售甲基汞有證標準溶液，并參照制造商的產(chǎn)品說明書保存。4.20 乙基汞標準貯備液：?(C2H5Hg+)＝1.00 mg/L。購買以甲醇為溶劑的市售乙基汞有證標準溶液，并參照制造商的產(chǎn)品說明書保存。注：如果使用的標準溶液（4.19、4.20）濃度是以氯化甲基汞（CAS No. 115-09-3）或氯化乙基汞（CAS No. 107-27-7）計，應換算成甲基汞或乙基汞的濃度。4.21 混合標準中間液：?＝100 µg/L。分別移取 5.00 ml 甲基汞標準貯備液（4.19）和乙基汞標準貯備液（4.20）于50 ml 容量瓶中，加入 100 μl 鹽酸（4.1）和 250 μl 乙酸（4.2），用水定容至標線。此溶液在具聚四氟乙烯螺旋蓋的棕色玻璃試劑瓶或含氟聚合物試劑瓶中保存，在 4 ℃以下冷藏、避光可保存 8 個月。4.22 混合標準使用液：?＝10.0 µg/L。移取 5.00 ml 混合標準中間液（4.21）于 50 ml 容量瓶中，加入 100 μl 鹽酸（4.1）和250 μl 乙酸（4.2），用水定容至標線。此溶液在具聚四氟乙烯螺旋蓋的棕色玻璃試劑瓶或含氟聚合物試劑瓶中保存，在4℃以下冷藏、避光可保存 8 個月。4.23 濾膜：0.45 μm 醋酸纖維濾膜。4.24 氬氣：純度≥99.999%。5 儀器和設備5.1 采樣瓶：1 L 具螺口旋蓋的高密度聚乙烯塑料瓶、硼硅玻璃瓶或氟化聚乙烯瓶。5.2 液相色譜-原子熒光聯(lián)用儀：由液相色譜系統(tǒng)、在線紫外消解裝置及原子熒光光譜儀組成。5.3 色譜柱：填料粒徑為 5 μm，柱長 15 cm，內(nèi)徑 4.6 mm 的 C18反相色譜柱，或其他等效色譜柱。HJ 1268—202235.4 汞空心陰極燈。5.5 分液漏斗：125 ml、250 ml、2 L。5.6 一般實驗室常用儀器和設備。6 樣品6.1 樣品采集與保存按照 GB 17378.3、HJ 91.1、HJ 91.2、HJ 164 和 HJ 442.3 的相關規(guī)定采集樣品。樣品采集到采樣瓶（5.1）后，用鹽酸（4.1）調(diào)節(jié)樣品 pH 值至 1～2，加入 2 ml 飽和硫酸銅溶液（4.18），搖勻，并用干凈的聚乙烯袋密封采樣瓶，置于 4 ℃以下冷藏、避光保存，3 d 內(nèi)完成分析，避免貯存于高汞環(huán)境中或與高濃度汞樣品一起保存。若只測定甲基汞，可在 8 d 內(nèi)完成萃取。注：對中性樣品，每升加入約 4 ml 鹽酸（4.1）。6.2 試樣的制備取 1 L 樣品（6.1）置于 2 L 分液漏斗中，加入 30 g 氯化鈉（4.3），溶解后搖勻，用40 ml 二氯甲烷（4.12）萃取，振搖放氣后，繼續(xù)振蕩 10 min，靜置 10 min，待兩相分層后，收集有機相于錐形瓶中。再分別用 25 ml 二氯甲烷（4.12）萃取 2 次，將 3 次萃取所得有機相合并于錐形瓶中，向錐形瓶中加入適量無水硫酸鈉（4.10）至呈流沙狀。將有機相轉移至 125 ml 分液漏斗中，再用少量二氯甲烷（4.12）沖洗錐形瓶后合并至分液漏斗中。用 3 ml 反萃取液（4.16）萃取，振搖放氣后，繼續(xù)振蕩5 min，靜置10 min，待兩相分層后棄去有機相，水相經(jīng)濾膜（4.23）過濾后，置于樣品瓶中，在4 ℃以下冷藏，6h內(nèi)完成分析。注 1：海水樣品可不加氯化鈉，直接萃取。注 2：如果萃取過程中乳化現(xiàn)象嚴重，可采用攪動、離心、玻璃棉過濾等方法破乳，也可采用冷凍的方法破乳。注 3：若只測定甲基汞，試樣可在 4 ℃以下冷藏保存 5 d。6.3 空白試樣的制備用實驗用水代替樣品，按照與試樣的制備（6.2）相同步驟制備空白試樣。7 分析步驟7.1 儀器參考條件7.1.1 液相色譜參考條件液相色譜采用等度分離，流動相（4.17）流速：1.0 ml/min；柱溫：30 ℃；進樣體積：100µl。7.1.2 原子熒光參考條件開啟儀器，按照儀器操作說明書要求調(diào)節(jié)儀器至最佳工作狀態(tài)，開啟紫外消解裝置，將載流（4.13）、還原劑（4.14）和氧化劑（4.15）泵管插入相應的試劑瓶中，預熱穩(wěn)定后，進樣分析。參考測量條件見表 1。HJ 1268—20224表 1 原子熒光參考測量條件負高壓（V） 燈電流（mA） 原子化器溫度（℃） 載氣流量（ml/min） 屏蔽氣流量（ml/min）積分方式280～320 30～50 200 300～500 500～900 峰面積7.2 標準曲線的建立取適量混合標準使用液（4.22），用反萃取液（4.16）稀釋，配制至少5 個濃度點的標準系列，甲基汞和乙基汞的質(zhì)量濃度分別為 0.00 µg/L、0.200 µg/L、0.500 µg/L、1.00 µg/L、2.00 µg/L、5.00µg/L、10.0 µg/L（此為參考濃度）。按照儀器參考條件（7.1），由低濃度到高濃度依次測定標準系列溶液，以甲基汞和乙基汞的質(zhì)量濃度為橫坐標，對應的色譜峰面積為縱坐標，建立標準曲線。7.3 試樣測定按照與標準曲線的建立（7.2）相同的條件測定試樣（6.2）。如果試樣中甲基汞或乙基汞的濃度超出標準曲線的上限，應減少取樣量或用反萃取液（4.16）稀釋試樣后重新測定。7.4 空白試驗按照與試樣測定（7.3）相同的條件測定空白試樣（6.3）。8 結果計算與表示8.1 定性分析根據(jù)樣品中目標化合物與標準系列中目標化合物的保留時間定性。必要時，可采用標準加入法輔助定性。在儀器參考條件（7.1）下，甲基汞和乙基汞的標準色譜圖見圖 1。圖 1 甲基汞和乙基汞標準色譜圖（ρ＝5.00 μg/L）乙1600140012001000800600400200000 1 2 3 4 5 6 7 8HJ 1268—202258.2 定量分析樣品中甲基汞或乙基汞的質(zhì)量濃度按照公式（1）計算。s,i 1iρ Vρ V?? （1）式中：ρi——樣品中甲基汞或乙基汞的質(zhì)量濃度，ng/L；ρs,i——由標準曲線得到的試樣中甲基汞或乙基汞的質(zhì)量濃度，μg/L；V1——反萃取液體積，ml；V——樣品的體積，L。8.3 結果表示測定結果最多保留 3 位有效數(shù)字，小數(shù)點后的位數(shù)與方法檢出限一致。9 準確度9.1 精密度6 家實驗室對甲基汞和乙基汞加標濃度為 0.600 ng/L、3.00 ng/L 和 24.0 ng/L 的地表水樣品重復測定6 次：甲基汞的實驗室內(nèi)相對標準偏差分別為 1.5%～7.1%、2.9%～6.4%和2.7%～9.3%；乙基汞的實驗室內(nèi)相對標準偏差分別為 2.8%～7.1%、3.7%～9.9%和 4.4%～14%。6 家實驗室對甲基汞和乙基汞加標濃度為 0.600 ng/L 的海水樣品重復測定6 次：甲基汞和乙基汞的實驗室內(nèi)相對標準偏差分別為 1.8%～7.0%和 2.2%～7.0%。6 家實驗室對甲基汞和乙基汞加標濃度為 3.00 ng/L 的生活污水樣品重復測定6 次：甲基汞和乙基汞的實驗室內(nèi)相對標準偏差分別為 4.3%～9.8%和 5.4%～12%。6 家實驗室對甲基汞和乙基汞加標濃度為 24.0 ng/L 的工業(yè)廢水樣品（含甲基汞濃度為2.99ng/L～8.14 ng/L）重復測定 6 次：甲基汞和乙基汞的實驗室內(nèi)相對標準偏差分別為1.7%～7.7%和5.7%～11%。9.2 正確度6 家實驗室對甲基汞和乙基汞加標濃度為 0.600 ng/L、3.00 ng/L 和 24.0 ng/L 的地表水樣品重復測定6 次：甲基汞加標回收率分別為 78.0%～96.4%、73.6%～91.5%和 70.8%～109%；乙基汞加標回收率分別為 73.8%～98.5%、76.1%～109%和 71.7%～99.6%。6 家實驗室對甲基汞和乙基汞加標濃度為 0.600 ng/L 的海水樣品重復測定6 次：甲基汞加標回收率為 75.2%～102%；乙基汞加標回收率為 72.7%～94.0%。6 家實驗室對甲基汞和乙基汞加標濃度為 3.00 ng/L 的生活污水樣品重復測定6 次：甲基汞加標回收率為 71.3%～99.1%；乙基汞加標回收率為 70.1%～90.5%。6 家實驗室對甲基汞和乙基汞加標濃度為 24.0 ng/L 的工業(yè)廢水樣品（含甲基汞濃度為2.99ng/L～8.14 ng/L）重復測定 6 次：甲基汞加標回收率為 68.7%～80.3%；乙基汞加標回收率為66.8%～82.1%。HJ 1268—2022610 質(zhì)量保證和質(zhì)量控制10.1 空白試驗每 20 個樣品或每批次（少于 20 個樣品）應至少做 1 個實驗室空白，空白中甲基汞和乙基汞的濃度應低于方法檢出限。10.2 校準標準曲線的相關系數(shù)應≥0.995。每 20 個樣品或每批次（少于 20 個樣品）應測定1 個標準曲線中間濃度點的標準溶液，測定值與該點標準值的相對誤差應在±15%以內(nèi)。否則，應重新建立標準曲線。10.3 平行樣每 20 個樣品或每批次（少于 20 個樣品）應至少測定 1 個平行樣，平行樣的相對偏差應在±30%以內(nèi)。10.4 基體加標每 20 個樣品或每批次（少于 20 個樣品）應至少分析 1 個基體加標樣品，基體加標回收率應在65%～120%之間。11 廢物處置實驗中產(chǎn)生的廢棄物應分類收集，集中保管，并做好相應標識，依法委托有資質(zhì)的單位處理。12 注意事項12.1 液相色譜流動相的平衡時間與原子熒光穩(wěn)定時間相同。12.2 樣品測定完成后，液相色譜柱應使用體積分數(shù)為 50%甲醇水沖洗至少30 min，原子熒光管路用水沖洗至少 30 min。HJ 1268—20227附 錄 A（規(guī)范性附錄）方法檢出限和測定下限表 A.1 給出了甲基汞和乙基汞的方法檢出限和測定下限。表 A.1 方法檢出限和測定下限序號 化學名稱 英文名稱 CAS No. 方法檢出限（ng/L） 測定下限（ng/L）1 甲基汞 Methyl mercury 22967-92-6 0.08 0.322 乙基汞 Ethyl mercury 16056-37-4 0.1 0.4